您所在的位置:首頁 > ,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原抗體、酶底物、配體受體的結合反應及核酸雜交反應,通過紅、綠兩束激光分別檢測微球編碼和報告熒光來達到定性和定量的目的,一個反應孔內可以完成多達100種不同的生物學反應,是繼基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子檢測技術平臺。迄今為止十年時間,全球已有數百套基于xMAP技術的檢測平臺用于免疫學、蛋白質、核酸檢測、基因研究等領域,該技術已成為一種新的蛋白質組學和基因組學研究工具,也是最早通過美國食品與藥物管理局(FDA)認證的可用于臨床診斷的生物芯片技術。
1 液相芯片技術的原理
液質集成塊制度由很多的程度均一的橢圓形微球(直經5.5~5.6 μm)為中心要產品制成,每一種微球上固定不變有各不相同的電極原子,將哪些微球懸屏于一名液質制度中,就制成1個多名液質集成塊系統化,用這類系統化會對同個名圖紙中的不一各不相同原子并且開展論文判斷,種被稱作xMAP的論文判斷技術設備是199八年由意大利Luminex工司發掘完成的。 在高效液相整體中,為了能辨別各不相似的測試測試檢測器,每條種進行固定有測試測試檢測器的微球都很多個多樣的感覺代號,或稱熒光打碼。在微球開發具體步驟中摻雜了紅背景色和紅色幾種方式熒光染劑(這幾種方式染劑各是10種各不相似辨別),然后把微球種類100種各不相似的背景色,生成一些具備著多樣光譜圖位置的所含100種各不相似微球的陣列。各不相似背景色微球在種類激光手術培養下存在的熒光互不相似,那樣種類熒單是甄別各不相似微球的僅僅途經。利用率這100種微球,能能各用標出上100種各不相似的測試測試檢測器原子核。 檢查時前后腳加進印刷品和評估申請書范文單原子與標志微球響應,印刷品中的重要性原子(待檢查的抗原或抵抗能力、海洋生物素標志的靶核酸細節描寫、酶等)就能與電極和評估申請書范文單原子非特異聊天搭配,使交連電極的微球帶著錄入告范文單原子藻紅蛋清,繼而再生利用實驗儀器(如Luminex 100)對微球實施檢查和的結果介紹。Luminex 100主要包括微流技術水平使微球加快單列確認檢查緩沖區,并適用顏色和環保有兩種脈沖光分別是對獨立微球上的歸類熒光和評估申請書范文單原子上的評估申請書范文單熒光實施檢查。顏色脈沖光可將微球歸類,因而鑒定結論其他不一的響應分類(即一一定量研究);環保脈沖光可選擇微球上搭配的評估申請書范文單熒光原子的人數,因而選擇微球上搭配的重要性原子的人數(即一一定量)。由于,確認紅綠單色脈沖光的并且檢查,完工對響應的實時路況、一一定量研究和一一定量介紹。2 液相芯片技術的優點
高效高效液相集成ic辦法最出色的優勢:在與:僅需幾瓶樣例可以的同時明確、定量分析檢側工具一個樣例中的很多不一樣作用團伙,即強有力的加密管控檢側工具(multiplexing)。具體化接下,與傳統免疫抗體學或核酸檢側工具辦法對比,高效高效液相集成ic辦法都具有以下的有效優勢:。 2.1 mtk量 可對同樣樣板中的許多不相同效果分子式同時完成雷達回波圖、相關性、按量闡述。從理論上上說,比如不的存在對稱反應遲鈍,檢側的通量相等微球的類數,近年來至多達到到100種。這遠戰勝一兩個可以檢側一兩個項效果常用免役闡述法。 2.2 模本水量少 隨著在一款 個響應孔中應該此外實現100種各不相同的生物工程學響應,所以咧盡可能合理節省了范例量的使用量,少至1μl的范例量就行檢側,是適用于探討小比熱容珍稀試樣。 2.3 運營很簡單、快捷 考慮到是依托于色譜儀影響推動測力,如此影響較快快,孵育時候比傳統式的固相測量短。開展免役學定性剖析時,若使用的高親合力抗體陽性,2~3 h內即已完成測量,而核酸混種定性剖析在PCRPCR擴增后1 h內可知到結果。 2.4 靈巧高 微球外表積大,每次微球上可包被100 000個馴服表面抗原陽性,這樣的高高度密集的馴服表面抗原陽性保持了都可以很大層次地與模本中的抗原團伙運用,增長監測敏感度。低點監測溶度可達到到0.1 pg/ml. 2.5 檢側依據廣 可達3~5個數量級(如BioRad公司細胞因子檢測試劑盒的檢測范圍達到0.2~32 000 pg/ml,樣品無需濃縮或稀釋。
2.6 特喜歡的人強
必須洗滌劑就才可以立刻將和微球切合的與未切合的分子結構辯別一下,只獲取單體微球上的熒光數字信號,信噪比好。
2.7 更準確高朝
微球上的報告模板碳原子式熒光強度與整合的待測碳原子式正相關。因液質集成電路芯片新技術的檢則面積大,對此不必象ELISA檢則中一種需將模本多倍兌水,最后減太小誤差值。
2.8 再次性好
那是考慮到:首要,與ELISA依托酶調小效用的比色讀數比較,色譜儀集成塊方法中的熒光讀值更有隨便、安全、快速;第2,每一種的微球在線檢查測量100個,終于取熒光構造的中值為結果,這很于對每一家模板多次在線檢查測量了100次,而ELISA僅為雙復孔或三復孔,由此色譜儀集成塊在線檢查測量結果的精確性和多次性是ELISA尚未對比的。
2.9 成本低
互相探測兩個樣例中的單選題指標可節電時刻、樣例、生化制劑、消耗品和勞動就業(比ELISA法低10~100倍),有效減低探測生產生產成本,互相還增強了分享速度,僅需一少部分樣例既可以取得海量訊息。近年來互相探測10項細胞系要素的液質心片生化制劑的管理費共要為$1300/96孔($130/項/96孔),這比探測這一項指標的ELISA生化制劑的生產生產成本($500/項/96孔)低得多,另外還隨同探測指標的加大而進每一步有效減低管理費。 |
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